Прошу помочь с переводом статьи ! Гепатит С во внешней среде

[Ruslan]

http://jid.oxfordjournals.org/content/201/12/1859.full

[Феля]

Яндекс - переводчик в помощь.
Насколько устойчив вирус гепатита С (HCV)? Экологической стабильности ВГС и его восприимчивости к химическим Биоцидам

Ciesek1 Сандра,2, Мартина Friesland1, Йорг Steinmann3, Becker4 Бритта Хайнер Wedemeyer2 Михаил Петрович Manns2, Steinmann4 Йохен Томас Pietschmann1 и Айке Штайнманн

+
Данные Об Авторах

1 отделом экспериментальной вирусологии Twincore, центра экспериментальных и клинических исследований инфекции, совместное предприятие между Ганноверской медицинской школы и Центра Гельмгольца по исследованию инфекции, Ганноверская Высшая медицинская школа, Ганновер, Германия
2 отделение гастроэнтерологии, гепатологии и эндокринологии, Ганноверская Высшая медицинская школа, Ганновер, Германия
3 Института медицинской микробиологии Университетской клиники Эссен, Германия
4 Микролаб, Бремен, Германия

Перепечатки или переписки: Доктор Э. Штайнманн див экспериментальной вирусологии Twincore центра экспериментальных и клинических исследований инфекции Федор-Линенно-Штрассе 7-9 30625 Ганновер, Германия (eike.steinmann@twincore.de).


Следующий Раздел
Аннотация

Фоне. При отсутствии в системе культуры клеток для размножения вируса гепатита C (ВГС), противовирусной активности дезинфицирующих средств против ВГС были экстраполированы из исследований с вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота. Недавнее развитие системы HCV-инфекции позволило прямая оценка экологической стабильности и чувствительность к химическим дезинфектантам.

Методы. Исследования проводились с использованием клеточных культур, выращенных ВГС. Инфекционность была определена путем ограничения разведения. Уровни РНК ВГС были проанализированы количественные режиме реального времени полимеразной цепной реакции. Стабильность генома был определен трансфекции восстановленных РНК в Huh7.5 клеток и иммунное.

Результаты. Инфекционность гепатита С в жидкой среде был обнаружить до 5 месяца при более низких температурах. Риск инфицирования ВГС не может быть точно отражены на определение уровня РНК ВГС, потому что вирусную инфекционность и количество РНК ВГС копировать напрямую не коррелируют. Различные спирты и доступного антисептика снижается инфекционность ВГС до неопределяемого уровня. Однако, разбавляя дезинфицирующим отменил вирулицидное действие.

Выводы. В данном исследовании проведена оценка экологической стабильности и чувствительность к химическим биоцидам ВГС. Результаты должны быть полезными в определении строгих протоколов дезинфекции для предотвращения внутрибольничной передачи ВГС.

Вирус гепатита С (HCV-инфекция) является серьезной проблемой общественного здравоохранения, с >130 млн. хронических носителей по всему миру. ВГС инфекция вызывает острые и хронические заболевания печени, включая хронический гепатит, цирроз печени и гепатоцеллюлярная карцинома [1]. В настоящее время нет вакцины против ВГС доступны, и медицинские работники подвергаются постоянному риску заражения ВГС инфекцией от воздействия. Кроме того, внутрибольничной передачи ВГС приходится значительная доля новых случаев заражения ВГС в западном мире. Например, госпитализация была единственным фактором риска примерно две трети случаев острого гепатита С в Испании [2, 3] и Италии [3], и 15% пациентов, зарегистрированных в крупной немецкой гепатит чистая острого ВГС базе стали nosocomially инфицированных [4, 5]. Главное, передача ВГС в медицинских учреждениях часто бывает связана с нарушениями в асептических методов [6, 7]. Например, пациент-к-пациента вспышка Генотип ВГС 3А была вызвана общим солевым раствором, которые были загрязнены при многократном использовании шприцев, использованные для взятия крови из венозных катетеров [8]. Кроме того, из-за отсутствия соответствующих культуре клеток и на животных моделях восприимчивы к HCV-инфекции, основанные на фактических данных руководящие принципы по профилактике и лечению профессиональных вредностей являются неполными, так как до сих пор нет данных относительно стабильности ВГС и чувствительность к химическим дезинфектантам.

ВГС-положительный вирус нить РНК, принадлежащий к семейству flaviviridae. Его 9.6 Кб геном состоит из 5-нетранслируемые области (НТР), открытой рамки считывания, кодирующая большие polyprotein, и 3'-НТР [9]. В polyprotein расщепляется на 10 отдельных протеинов наращивание вирусная частица (ядро, Е1 или Е2) или необходимые для репликации РНК (неструктурным белкам). В последнее время система клеточной культуры на основе японских молниеносный гепатит (JFH) ВГС изолят, который воспроизводит полный вирусного цикла репликации в пробирке [10 - 12]. Культура клеток-производных частиц ВГС являются инфекционные на животных моделях, тем самым подтверждая их подлинность. Эта система позволила нам решить впервые экологическая стабильность ВГС и его восприимчивость в отношении обычно используются руки антисептиками.

В прошлом, инактивации ВГС с помощью химических дезинфицирующих средств проводилось в основном с вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV) в качестве суррогатного вируса, из-за сходства в структуре генома и режим репликации ВГС [13]. В данном исследовании мы стремились систематически исследует долгосрочное экс-виво стабильность и чувствительность ВГС в различных дезинфектантов и антисептиков.
Предыдущем Разделе
Следующий Раздел
Материал И Методы

Плазмиды и вирусы. Конструкции JFH1 и Ос1 были описаны в последнее время [10, 14]. Построить Люк-Ос1 кодирует химерный ВГС polyprotein, которые состоят из кодонов 1-846 происходит от семейства j6/МВ [15] в сочетании с кодонами 847-3033 из JFH1. В этом генома ВГС polyprotein кодирования регион находится во второй cistron и выражается через внутреннюю запись рибосомы элементов сайта производный от вируса encephalomyocarditis. Первый cistron содержит ген люциферазы светлячка репортер сросшиеся на JFH1-производные 5'-НТР и кодирования регионе Nterminal 16 аминокислот JFH1 ядра [16].

BVDV НАДЛ штамм (ВР-534) была получена от доктора Bendtfeld Стефани (Институт вирусологии факультета ветеринарной медицины, Ганновер). До анализов инактивации, вирус был один раз пересевали в первичных клетках почки говяжьи и 5 раз в коп-Р ячеек (первичных клеток из ротоглотки ткани крупного рогатого скота).

Руки антисептиками. Семь рук антисептики были выбраны изучить эффективность против гепатита С, включая 3 силы скрабы и 4 руки потирает. Руки скрабы включенными продукта (на основе повидон-йода), продукта б (на основе хлоргексидина биглюконат) и С (на основе триклозана). Руки потирает включенными продукт D (55 г этанола и 10 г 1-пропанола), продукта Е (>90 г этанола), продукту F (55 г этанола и 10 г 1-пропанола), и г продукта (45 г этилового спирта и 18 г 1-пропанола).

Культуры клеток. Huh7.5 клетки культивировали в модифицированной среде Dulbeccòs Орел (Invitrogenбыл) с 10% фетальной бычьей сыворотки, 1 × заменимых аминокислот (Invitrogenбыл), 100 мкг/мл стрептомицина (Invitrogenбыл), и 100 ед/мл пенициллина (Invitrogenбыл). Коп-Р клетки для репликации BVDV возник из Bundesforschungsanstalt фу'a8r Viruskrankheiten в der Tiere (д-р р. Riebe).

В транскрипции пробирке, электропорация, и производства культуры клеток-производных ВГС. На основе плазмидной ДНК, кодирующий JFH1 изолировать или их производных [11, 14, 17], в лабораторной расшифровки отдельных конструкций, сформированные, как описано ранее [16]. После 48 ч, супернатант собирали и фильтровали через фильтры с 0.45 мм поры. Чтобы определить вирусную инфекционность, бесклеточной надосадочной жидкости использовали для заражения наивный Huh7.5 клеток-мишеней.

Подготовка BVDV подвески. Для приготовления теста вирусной суспензии, коп-Р клетки культивировались с орлиным минимальной основной среде (Cambrex Био науки Вервье) с добавлением L-глутамина, пирувата натрия и 10% или 2% фетальной сыворотки теленка (Biochrom; антитела против BVDV не прощупывается) и инфицированных BVDV (наличии вирусной суспензии). Как только клетки показал постоянная цитопатического эффекта, они были подвергнуты быстрому замерзанию-оттаиванию процедуры. За этим последовали низкоскоростным центрифугированием (10 мин при 1000 г) осадок клеток. Тест вирус подвески хранили при -80°С.

Определение BVDV инфекционность. Инфекционность была определена путем конечная точка титрования в разведении microprocedure. Для этого образцы были разбавлены ледяной Орел минимальная питательная среда с 2% фетальной телячьей сыворотки и 100 мл каждого разведения помещали в 8 лунки микротитровальных пластины. Коп-Р суспензии доводят до примерно 10 - 15 × 103 клеток на лунку. Наконец, культурами наблюдались для цитопатических эффектов на 10 дней прививки.

Люциферазного анализа. Вирус или трансфицированные клетки были промыты дважды фосфатно-солевой буферный раствор (ФСБР) и лизису в 1000 мкл/лунку (6-луночный планшет) или 350 мкл/лунку (12-луночный планшет) люциферазы лизирующего буфера (1% Тритон х-100, 25 ммоль/л глицилглицина, 15 ммоль/л, сульфат магния, 4 ммоль/л гликоля этилена tetraacetic кислоты и 1 ммоль/л dithiothreitol, рН 7,8). Люцифераза светляка активность измеряли, как описано ранее [16], используя люминометром (Lumat 9507 ЛБ; Бертольд).

Количественное определение РНК путем обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (РТ-ПЦР). РНК выделяли из инфицированных клеток с помощью набора NucleoSpin РНК второй (Macherey-Нагель). РНК ВГС определяли с использованием LightCycler 480 (Рош), как описано ранее [18, 19].

Непрямой иммунофлюоресценции. Huh7.5 клеток высевали на стекло стекла в 24-луночные планшеты при плотности 2 × 104 клеток/см2 на лунку; они были исправлены 48 ч после заражения с использованием ПБС дополнен 3% параформальдегида в течение 10 мин при комнатной температуре. Окрашивание белка ns5a проводили как описано ранее [18].
Тестирование стабильности гепатита С в окружающей среде. Чтобы проверить влияние различных температур на гепатит контагиозность вирусных суспензий были сохранены в microfuge трубки при 4°C, 21°C или 37°C в течение соответствующего периода времени. Всего-образцы крови здоровых доноров были центрифугируют в течение 5 мин при 850 G для получения сыворотки. Эффект сыворотки на стабильность ВГС была проверена путем смешивания сыворотки и вируса суспензии в соотношении 1:1 в объеме 1 мкл. Для оценки влияния вирусной экспозиции к различным поверхностям, microfuge труб (Зарштедт) были использованы в качестве пластика, винты (нержавеющая сталь, 1.4301 crni стали 18/8), как стальной поверхности, и Пеха-софт виниловые неопудренные перчатки (Пауль Хартманн) как перчатки. Вирус подвеска (1 мкл) инкубировали на поверхности без сушки. Деятельность журналиста после различных временах инкубации измеряли, как описано выше. С учетом важности различных значений рН вирусной суспензии разводили в буфере ТН (10 ммоль/л Трис-HCl, рН 7.0; 50 ммоль/л хлорида натрия) и выдерживают в соотношении 1:1 в течение 4 ч. в процессе инфекции, как описано ранее [20].

Подвеска количественного анализа. Для ВГС и BVDV в пробирке инактивации, эксперименты проводились путем смешивания 1 часть тест вирус подвеска с 9 частями алкоголя разных видов или руки антисептиками. После инкубации с коротким временем экспозиции, тестирование смеси сразу же были серийно разводили в Dulbeccòs модифицированных Орел средне-стоп активности биоцидов, а затем титровали в 96-луночных микропланшетов. Чтобы уменьшить токсичность биоцидов, испытательная смесь очищали посредством гель-фильтрации с MicroSpin С-400 столбцов час (ДжиИ хэлскеа), в соответствии с инструкциями производителя. Вирус титры измеряли, используя конечную точку титрования разбавления, как описано в [11]. Вирусные титры (50% культуры ткани инвазионной дозы [ТЦД50/мл]) были рассчитаны по методу Спирмена и Kärber [19, 21]. Для определения цитотоксичности дезинфицирующих средств, 1 часть ПБС смешивают с 9 частями дезинфицирующим раствором и засевают в разрешительных клеток. Цитотоксичность определяли путем изучения разрешительной клеток при микроскопии каких-либо существенных изменений клеточного монослоя и рассчитывается аналогично титра вируса (ТЦД50/мл).
Предыдущем Разделе
Следующий Раздел
Результаты

Стабильность инфекционность гепатита С при разных температурах. Для оценки стабильности ВГС при различных температурах, вирусы репортер ВГС, кодирующих ген люциферазы светлячка инкубируют при 4°С, 21°С, А 37°C в течение до 10 дней, соответственно. Вирулентность определяется инокуляция Huh7.5 клеток и определения активности ВГС люциферазы проводили на вирусы репортер (Рис. 1А) или предельное разведение пробы на вирус дикий Тип (Рис. 1Б). At4C, инфекционность гепатита С снизилось лишь незначительно спустя 8 дней, тогда как инкубация при комнатной температуре привело к 10 кратному уменьшению инфекционности на данный момент времени. Инактивации ВГС до уровня фон был обнаружен при 37°С через 2 дня, что говорит о стабильности ВГС зависит от температуры (Рис. 1А). Далее, мы провели долгосрочный инкубаций ВГС на 4°C на срок до 252 дней. Интересно, что после 147 дней инкубации при 4°С инфекционность еще прощупывается и снизился до уровня фона только после 252 дней (Рис. 1Б). Период полураспада ВГС при различных температурах не отличаются между вирусом репортер и подлинного дикого типа ВГС (данные не показаны).
Рис. 1.


Устойчивость вируса гепатита C (ВГС) при различных температурах. А Люк-Ос1 вирус инкубировали при указанных температурах и интервалах времени, как вирус, тест подвески. Вирулентность определяется инокуляция наивный Huh7.5 клеток за 4 сек. ВГС количественно оценивали путем измерения активности репортер ВГС 48 ч позже. Продемонстрирован показательный эксперимент с 3 независимых повторений. РП, относительные световые единицы; Т1/2, халф-Лайф. Б Ос1 дикого типа вируса сохраняется на срок до 252 дней при 4°С. в указанные моменты времени, вирус аликвоты были проверены на инфекционность путем лимитирующего разведения пробы; ТЦД50, 50% культуры ткани заразную дозу. Был проведен один долгосрочный эксперимент.

Влияние сыворотки и различных поверхностей на стабильность ВГС. Потому что гепатит В естественных условиях, как правило, связано с сывороткой, эффект здорового человека в сыворотке крови анализировали путем инкубации гепатита С при комнатной температуре в течение ≥28 дней в присутствии и отсутствии сыворотки. Вирулентность определяли путем измерения активности репортер ВГС. Добавление сыворотки не изменить вирусный титр, что со временем снижается, достигая неопределяемого уровня после 21 дня инкубации при 21°С, что указывает сыворотке крови человека не имеет никакого влияния на устойчивость ВГС (Рис. 2А).
Рис. 2.

Значение сыворотки и различных поверхностей на вирус гепатита C (ВГС) стабильность. А Люк-Ос1 вирус хранился в присутствии сыворотки крови человека или среде при комнатной температуре на указанные моменты времени. Вирулентность определяется инокуляция наивный Huh7.5 за 4 сек. ВГС количественно оценивали путем измерения активности репортер ВГС 48 ч позже. Продемонстрирован показательный эксперимент с 3 независимых повторений. Отн. ед., условных единицах. B, вирус гепатита репортер Люк-Ос1 инкубировали в вирусной суспензии на пластике, стали, или перчатки при комнатной температуре для указанного момента времени. Инфекционность репортер ВГС определяли путем инокуляции наивный Huh7.5 клеток. Продемонстрирован показательный эксперимент с 3 независимых повторений.

Потому что работники здравоохранения и пациенты могут быть подвержены ВГС на загрязненных образцов на разных поверхностях, то далее определяется инкубации вируса в жидкой суспензии на пластике, стали, или перчатки могут изменить устойчивость ВГС. Как показано на рисунке 2Б, никакой существенной разницы между тестируемыми поверхности обнаружено не было.

Влиянием высокой температуры и различных рН на инфекционность гепатита. Бережное обращение ВГС-позитивных материалов в больницах и врачебной практике может предотвратить внутрибольничной передачи вируса. Однако, пока неизвестно, насколько эффективно HCV может быть инактивирован под действием тепла. Вирусные суспензии инкубировали в течение 1, 5 или 10 мин при температуре от 40°C до 90°C. остаточная инфекционность гепатита С еще прощупывается при температуре 60°С–65°С и инкубационный период 5 или 10 минут. Более чем 100-кратное снижение инфекционности менее предела обнаружения анализа наблюдалась через 5-мин воздействия вируса на 75С или 1-мин выдержки при температуре 70°C (Рис. 3А). Кроме того, важность изменения рН на вирусную стабильность была проверена инкубации гепатита С при различных значениях рН в течение 4 ч после определения активности репортер ВГС. Инфекционность гепатита С не влияет на значения рН в пределах между 4 и 9 (Рис. 3Б).
Рисунок 3.

Эффект тепла и различных значений рН на вирус гепатита С (HCV) стабильность. А Люк-Ос1 вирус инкубировали при указанных температурах и временных интервалах, вирусной суспензии с объемом 300 мкл в отопительный блок. Вирулентность определяется инокуляция наивный Huh7.5 клеток за 4 сек. ВГС количественно оценивали путем измерения активности репортер ВГС 48 ч позже. Отн. ед., условных единицах. В, люк-Ос1 вирусы репортер обращаются с разными значениями рН после определения инфекционность гепатита С прививка наивных Huh7.5 клеток и определения активности люциферазы. Представитель экспериментировать с 3 независимых повторений показано (A и B).

Инфекционность гепатита С, по сравнению с HCV-РНК копирование номеров. Нетрадиционный путь передачи ВГС могут быть бытовые предметы, такие как зубные щетки, бритвы или маникюрных ножниц. Существует несколько докладов о том, что РНК ВГС обнаруживается на таких устройствах, а также на медицинское оборудование [22-25]. Кроме того, наличие геномов HCV в биологических жидкостях кроме крови была описана. Однако неясно, в какой степени наличие геномной РНК ВГС на бытовых устройствах, медицинском оборудовании или различных жидкостях организма коррелирует с риском инфицирования.

Поэтому мы исследовали вирусной инфекционности и количество РНК ВГС при длительном хранении вируса при комнатной температуре. Принимая во внимание вирусную инфекционность значительно снижается после 21 дней, а ниже предела обнаружения данного метода анализа в более поздние моменты времени (Рис. 4А), копий РНК числа почти 1010 копий/мл была измерена на протяжении всего времени инкубации 35 дней (Рис. 4Б). Чтобы определить, является ли потеря инфекционности было связано исключительно с неспособностью вирусной частицы проникать в клетки через обычный канал входа, или же вирусный геном сам был не заразным, мы трансфицированные РНК вирусной частицы, связанные с подготовка в дни 0 и 21 в весьма либеральными Huh7.5 клеток. Успешной инициации репликации вирусной РНК оценивали с помощью визуализации антигена HCV-позитивных клеток с помощью иммунофлюоресценции. РНК ВГС оправился от вирионов в день 0 был заразен с 180 focusforming единиц и эффективно реплицироваться в гепатомы человека линии клеток при введении путем трансфекции. В отличие от этого, нет антигеном HCV позитивных клеток были обнаружены при HCV РНК из вирусов на 21 день был трансфицированных (Рис.4В).
Рисунок 4.
Действие этанола, 1-пропанола и 2-пропанола на устойчивость ВГС. Этанол, 1-пропанол и 2-пропанол активные ингредиенты коммерческой спиртосодержащие антисептики и дезинфицирующие средства, используемые в медицинских учреждениях. В последние годы BVDV как суррогатный вирус был использован для того чтобы оценить эффективность фунгицидных антисептиков из-за отсутствия соответствующей модели культуры клеток ВГС. Для определения эффективности различных видов алкоголя на ВГС (Рис. 5А) и BVDV (Рис. 5Б) стабильность, мы прорастив 2 вирусов на 1 или 5 мин с этанолом, 1propanol, или 2-пропанол в концентрации от 5% до 40%. Самый эффективный алкоголь для инактивации ВГС и BVDV был 1-пропанол, снижение вирусного титра до уровня фона при концентрации 20% после того, как время экспозиции на 1 и 5 мин соответственно. В случае этанола, титры ВГС снизился в концентрации 30% и 40%, а полная инактивация наблюдалась только для BVDV, в концентрации 40% и 5 мин времени инкубации. По сравнению с BVDV, ВГС был чуть более устойчив к этанол и 2-пропанол. Кроме того, мы протестировали эффективность инактивации ВГС глютаровый альдегид, надуксусная кислота как 2 типа высокого уровня дезинфекции. Глутаровый альдегид 0,5%, а peracteic кислотой 0.05% смогли полностью инактивации ВГС в 1 мин времени инкубации (данные не показаны).
Рис. 5.

Сравнение инактивация вируса гепатита С (HCV) и бычьей вирусной диареи (BVDV) различных видов алкоголя. А, этанола, 1-пропанола и 2-пропанола были проверены на их эффективность в инактивации ВГС. Концентрация биоцида варьировались от 5% до 40%, с временем экспозиции 1 или 5 минут. Для инактивации анализ, вирус 1 часть смешивается с 9 частями алкоголя. Остаточная вирулентность определяли по конечной точке титрования разбавления. Вирусные титры отображаются в виде 50% культуры ткани инфекционных доз (ТЦД50) значений. Б эффективность этанола, 1-пропанола и 2-пропанола в отношении BVDV обратился количественные подвеска анализа, как описано для группы . Вирусные титры даны как значения ТЦД50. Представитель экспериментировать с 3 независимых повторений показано (A и B).
Эффективность при действии имеющихся в продаже дезинфицирующих средств против ВГС. Кроме того, 7 коммерческих руку антисептики были испытаны на их способность к инактивации ВГС количественное испытание суспензии. Инкубационный период 30 s был выбран, и различных продуктов (изделий А–Г) оценивали по концентрации 90% (Рис. 6А) или 1:10 разведения (10%) (Рис. 6Б). Неразбавленный, все проверенные коммерческие антисептики инактивированная инфекционного ВГС до неопределяемого уровня (Рис. 6А). Далее мы исследовали, может ли разведенный 1:10 коммерческих антисептики сказалось на вирулицидное действие продуктов. Как показано на рисунке 6Б, дополнительное разбавление спиртовой основе для протирки рук Д–Г утратил силу инактивации свойства этих рук антисептиками. В отличие от ручной стирки изделий А–С—на основе повидон-йод, хлоргексидин биглюконат и триклозан, соответственно—были эффективны против ВГС в концентрации 10%.
Рисунок 6.


Влияние коммерческого силы антисептиками против вируса гепатита C (ВГС). А семь коммерческого силы антисептиками (продукции А–Г) были испытаны в количественном подвеска анализа их эффективности инактивации ВГС. Инкубационный период 30 С с различными продуктами на 90% концентрации. ТЦД50, 50% культуры ткани заразную дозу. B, Коммерческая дезинфицирующих средств (изделий А–Г) разводят 1:10 с водой и оценено в количественном подвеска анализа, как описано для . Представитель экспериментировать с 3 независимых повторений показано (A и B).
Предыдущем Разделе
Следующий Раздел
Обсуждение

В данном исследовании проведен комплексный анализ устойчивости ВГС с помощью недавно разработанной системы клеточной культуры полностью свободную для HCV-инфекции и репликации. Эта система-инфекции основана на человеческих клетках гепатомы и вирусы, созданные в пробирке, которые могут отличаться от нормальных человеческих гепатоцитов и пациента, полученные вирусные частицы в некоторых аспектах. Однако, учитывая недавний прогресс в исследованиях ВГС применения этой системы [26], культуры клеток-производных частиц ВГС считаются лучшим инструментом для решения описанной здесь вопросы.

А ВГС был на удивление стабильным при комнатной температуре 4°с, добавлением сыворотки крови человека или инкубации на различных поверхностях не менять профиль устойчивости вируса [27]. Учитывая, что высокий титр препаратов от гепатита С хорошо прощупывается сохраняют инфекционность в течение нескольких дней даже при хранении при комнатной температуре, можно предположить, что ВГС загрязненных материалов и настои представляют собой значительный риск для передачи. Поэтому эти данные имеют важное значение для профилактики внутрибольничной передачи и больного к вспышкам вирусного гепатита [28]. Характер передачи вируса гепатита В (ВГВ) является подобный ВГС, и это hepadnavirus было также показано, чтобы быть достаточно устойчивы во внешней среде. После сушки и хранения ВГВ-положительных человеческих плазмы в течение 1 недели, прививка шимпанзе результате активной hbv-инфекции [29]. Больше время инкубации не были рассмотрены в данном исследовании.

Экспериментальная модель шимпанзе также был использован Камили и соавт [30], которые сушили и хранили в плазме гепатита С В течение 16 ч., 4 дня и 7 дней при комнатной температуре после инокуляции образцов в шимпанзе. Нет заражение произошло после инокуляции материала, хранящиеся на 7 и 4 дня, но с 16-х образец воздействия, HCV-инфекции развивается в животное. Важно иметь в виду, что до сих пор нет четкой корреляции между культурой тканевой инфекционной дозы и шимпанзе инфекционной дозы была установлена на ВГС. Поэтому, а также из-за разных условий хранения и различными вирусными дозы исходного материала, невозможно напрямую сравнивать Продолжительность заразности гепатита между этими исследованиями. Кроме того, развитие ВГС-специфический клеточный иммунитет может также повлиять на результаты [31, 32]. Поскольку эксперименты шимпанзе очень ограничены в силу этических соображений и высокие затраты, оценка инфекционность гепатита С культурой анализы ткани, описанные в данном исследовании, должны быть ценным способом для оценки риска передачи вирусной инфекции [10, 11].

Главное, мы показали, что количество РНК ВГС не обязательно коррелирует с вирусной инфекционности, которая также наблюдалась в прижизненное исследование Камили и соавт [30]. Несколько исследований, в которых рассматриваются различные риска передачи ВГС [22 - 24, 33] были основаны на выявлении HCV РНК с помощью ПЦР-РВ. Отсутствие корреляции между обнаружением геномных копий (определить с помощью ПЦР-РВ) и инфекционные (определяется ТЦД50), или даже вирусный геном сохранности (определяется retransfection анализа), должны быть учтены при толковании RTPCR ВГС-положительные результаты в отношении риска для здоровья человека; аналогичные результаты были отмечены для других вирусов [34 - 36]. Одно из возможных объяснений этих данных состоит в том, что только короткие фрагменты генома РНК ВГС усиливаются от-ПЦР, и улучшение диагностических средств для усиления полныйдлина генома РНК существенно укрепит надежность результатов испытаний. Дополнительные клинические и экспериментальные исследования необходимы, чтобы лучше оценить инфекционность и устойчивость гепатита С в грудном молоке и сперме и риск передачи связан с ВГС в этих жидкостях.

Что касается профилей инактивации ВГС для различных видов спиртов, мы показали, что 1-пропанол является наиболее эффективным спирта в количественных тестов подвески. В целом, по сравнению с ВГС и его часто используют суррогатные BVDV продемонстрировали лишь незначительные изменения в чувствительности к веществам. Инактивации ВГС коммерческих антисептики показал преимущество силы скрабы более на спиртовой основе дезинфицирующие средства в разведении 1:10, что обусловлено различными механизмами инактивации оболочечным вирусом. Потому что в практических условиях антисептики не разводили, нельзя сделать вывод в пользу скрабы для гигиены рук.

В резюме, это первое систематическое исследование устойчивости ВГС и чувствительность к различным дезинфицирующих средств и антисептиков имеет важные последствия для управления воздействием ВГС. Мы предлагаем очень строгого соблюдения установленных санитарным требованиям должно быть обязательным, чтобы избежать внутрибольничных и профессиональных заражений гепатита, даже если материалы были заражены с HCV несколько недель назад.
Предыдущем Разделе
Следующий Раздел
Работа
Мы благодарны Takaji Вакита и Бух Йенса JFH1 и J6CF изолятов, соответственно, и Чарльз Рис для Huh7.5 клеток и E9E10 моноклональных антител. Мы благодарим Томаса фон Хан за критическое чтение рукописи. Наконец, мы благодарим Уве Херциг за техническую поддержку и хотел бы также поблагодарить всех членов кафедры экспериментальной вирусологии Twincore, за полезные советы и обсуждения.
Предыдущем Разделе
Следующий Раздел
Сноски

Потенциальные конфликты интересов: не сообщалось.

Финансовая поддержка: ВИТ-Джорджия, Ганноверской медицинской школе (финансируемый bmbf) с (С. С.), деревне хилф инициативе (очный молодой следователь премии С. С.), и женские программы поддержки Ганноверской медицинской школе (Грант С. С.); Гельмгольца (гранты так-024 и га-202 т. п.); Гельмгольц центра исследования инфекционных заболеваний (очный молодой следователь премии е. С.).

Получил 24 Сентября 2009 Года.
Принято 6 Января 2010 Года.

© 2010 общества инфекционных болезней Америки

[Ruslan]

Феля спасибо !

[Ruslan]

http://www.hepatitiscentral.com/news/hepatitis_c_sur/

[Ruslan]

Как все большее число людей с диагнозом гепатит С, спрос, чтобы понять, как этот вирус может передаваться растет соответственно. Ученые знают, что вирус гепатита С (HCV) в основном передается через кровь к контакту крови; Тем не менее, существует, как правило, посредник между зараженной кровью и еще-не-инфицированной кровью. В зависимости от нескольких различных переменных, неодушевленное посредник может держать ВГС жизнеспособными в течение удивительно долгого времени.

Каждый вирус имеет различные возможности для выживания вне организма. По данным клиники Майо интерниста Джеймс М. Steckelberg, доктор медицинских наук, продолжительности времени, вирус выживает частично зависит от того, где зародышевые нагруженные капли падают. Эксперименты с конкретными простуды и гриппа микробов обнаружили следующее:

Потенциальное время выживания для вируса вне диапазона тела от нескольких минут до 48 часов или более.
При простуде и гриппе микробы обычно остаются активными дольше на нержавеющей стали, пластика и других подобных твердых поверхностях, чем на ткани и других мягких поверхностях.
Демонстрация того, что все вирусы отличаются, вирусы гриппа, кажется, живут дольше, чем холодные вирусы - независимо от поверхности.
Другие факторы, влияющие как долго микробы могут выжить вне тела являются температура окружающей среды, ее влажности и количество вируса оседает на поверхности.

Некоторые из этих переменных оказывают непосредственное влияние на то, как долго ВГС может жить вне организма. Тестирование крови на открытых поверхностях при рассмотрении текстуры поверхности, в комнатной температуре, количество крови подвергается, вирусная нагрузка (низкая / высокая) и различных загрязняющих веществ в окружающую среду делает определение того, как долго гепатита С выживает вне тела очень сложной.

По сравнению с другими вирусами, HCV является относительно выносливы патоген. Известный, чтобы выжить вне тела в течение нескольких дней в высохшей крови на поверхностях, гепатит С может сохраняться в течение нескольких месяцев в жидкой среде при благоприятных условиях. По данным Центров США N по контролю и профилактике заболеваний, ВГС не может выжить на экологических поверхностях при комнатной температуре в течение не менее 16 часов, но не более чем за четыре дня. В отличие от этого, вирус ВИЧ может жить только на поверхностях в течение нескольких часов.

Как сообщалось в 15 июня 2010 года издание журнала инфекционных болезней, исследователи из Германии подтвердили, что ВГС выживает дольше в жидкостях, чем она при высыхании на поверхности. Они обнаружили, что в жидкой среде, ВГС был обнаружен в течение пяти месяцев при более низких температурах.
Как было опубликовано в феврале 2010 года издания вирусологии Journal, китайские исследователи определили, что вирус гепатита может выжить в жидкой среде в течение двух дней при 98ºF (температура тела), 16 дней при 77 ºF и по меньшей мере за шесть недель при 40ºF (средняя температура холодильника).
Представленный в феврале 2010 года на 17-й конференции по ретровирусы и оппортунистических инфекций, американские исследователи обнаружили, что при правильных обстоятельствах, HCV остаются жизнеспособными в шприце на срок до 63 дней. Обстоятельства, при которых увеличение инфекционности вируса гепатита C включают шприцы с иглами, съемными более низкую температуру и большие шприцы объема.

Способность вируса гепатита C, чтобы жить в течение длительного периода времени вне организма при правильных условиях имеет чрезвычайные последствия для ее передачи. Некоторые из известных носителей для передачи вируса относятся соломинки, используемые для употребления наркотиков носа, иглы, используемые для введения лекарственных средств, нанесение татуировок, обмен личного снаряжения для ухода, как бритвы или зубные щетки, определенных сексуальных устройств и повторного использования медицинского оборудования в учреждениях здравоохранения.

Хотя мы знаем, что она распространяется между источниками крови, неодушевленные предметы часто выступают в качестве посредника для передачи инфекции. Таким образом, понимание того, как долго вирус гепатита С может жить вне организма - во всех ситуациях - могут помочь нам к отказоустойчивых практике для снижения риска передачи вируса гепатита С.